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生物素标记

    生物素标记


    生物素-亲合素系统 (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期应用于免疫学,并得到迅速发展的一种新型生物反应放大系统。由于它具有生物素与亲合素之间高度亲和力及多级放大效应,并与荧光素、酶、同位素等免疫标记技术有机地结合,使各种示踪免疫分析的特异性和灵敏度进一步提高。主要有用于标记多肽氨基的生物素N-羟基丁二酰亚胺酯(BNHS)和生物素对硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS最常用,当然,也可以直接使用生物素也可以标记,因为其结构上有个游离的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法缩合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶剂增加溶解度。

    此外生物素是复合维生素B2的组成部分。它与鸡清蛋白、亲和素、真菌蛋白、链霉亲和素均有较高亲和性和结合力。亲和素和 链霉亲和素都是四聚体蛋白,可紧紧地结合四分子D-biotin,其结合力是已知自然界中最强的非共价作用。生物素与亲和素之间的相互作用可用于蛋白纯化、检测、固化、药物导向和蛋白质结构分析等方面。多肽生物素标记常在肽的N端或Lys侧链;肽链 C端也可用Biotin标记,此时肽链C端需引入Lys或者乙二胺结构。




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