Nuclear localizing sequence 是一种发挥诱导剂功能的肽序列，在哺乳动物细胞中具有膜渗透活性。Nuclear localizing sequence 可增强细胞摄取能力，并将偶联的钌 (II) 复合物导向细胞核，用于细胞核 DNA 成像。

Nuclear localizing sequence (Compound 12a) 可将偶联的 [Ru (bpy)2 (dppz)]2+ 复合物靶向细胞核，借助该复合物的“光开关”发射行为实现核 DNA 的选择性成像

Nuclear localizing sequence 与带有高氯酸根抗衡离子的钌 (II) 联喹啉复合物偶联后，可在 CHO 和 HeLa 细胞中实现高效细胞摄取

单字母 H2N-VQRKRQKLMP-NH2

多字母 H2N-Val-Gln-Arg-Lys-Arg-Gln-Lys-Leu-Met-Pro-NH2

氨基酸个数 10

分子式 C55H103N21O12S1

平均分子量(MW) 1282.6

CAS No. : 503474-42-8

报道了一种光稳定性良好的钌配合物Ru(2,2-联喹啉)₂(3-(2-吡啶基)-5-(4-羧基苯基)-1,2,4-三唑olate)（Ru(biq)₂(trzbenzCOOH)），其近红外（NIR）发射峰位于786 nm。该母体配合物通过酰胺偶联与细胞穿透肽序列八聚精氨酸（R8）以及两种信号肽序列连接：核定位序列（NLS）VQRKRQKLMP和线粒体穿透肽（MPP）FrFKFrFK(Ac)（r = 精氨酸的D型异构体，Ac = 末端赖氨酸氨基被乙酰化封闭）。值得注意的是，这些肽偶联物以氯化物盐形式均不具备细胞渗透性，但在与高氯酸根阴离子进行离子交换后，表现出高效且快速的膜穿透能力。此外，令人意外的是，这三种肽偶联物在CHO和HeLa细胞系中均表现出显著的暗毒性。肽偶联物通过依赖caspase的凋亡通路诱导细胞死亡。在实现细胞成像所需的最低染料浓度（约15 μM）下，孵育24小时后仅有20%的细胞存活。为克服细胞毒性，对母体配合物进行了PEG化修饰；这显著降低了细胞毒性，即使在24小时后浓度达到150 μM时，仍有50%的细胞存活。共聚焦发光显微镜显示，四种生物偶联物（以高氯酸盐形式存在的肽和以氯化物形式存在的聚乙二醇）均能迅速被细胞内吞。然而有趣的是，与相关复合物中观察到的信号肽精确定位不同，此处并未出现该现象，且由于其较高的细胞毒性，这些肽偶联物不适合作为细胞显微成像的发光探针。此次信号肽靶向效果不佳的原因归因于金属中心的高度亲脂性。

参考文献：DOI: 10.1016/j.jinorgbio.2020.111032