FGLP21是一种靶向FGL1的多肽。FGLP21对FGL1的模拟结合亲和力为-9.56kcal/mol，并在FGL1阳性Huh7细胞竞争性结合实验中抑制68Ga-NODA-FGLP21与FGL1的结合，IC50为101.0nM。FGLP21优先结合FGL1阳性Huh7细胞，过量未标记FGLP21可明显阻断68Ga-NODA-FGLP21在Huh7异种移植瘤中的摄取。FGLP21可用于FGL1靶向肿瘤成像及免疫检查点研究。

FGLP21 对纯化的 FGL1 蛋白表现出 -9.56 kcal/mol 的模拟结合亲和力，这种亲和力源于特定肽段与蛋白残基之间的氢键作用

Biotin-labeled FGLP21 (8 μg/mL; 2 h) 可特异性结合 FGL1 阳性的人肝癌细胞 Huh7，表现为强烈的荧光信号；但与 FGL1 阴性的人脑胶质瘤细胞 U87 MG 的结合作用极弱

Unlabeled FGLP21 (0.01 nM-100 μM; 2 h) 可抑制 68Ga-NODA-FGLP21 与 FGL1 阳性的人肝癌 Huh7 细胞的结合，其 IC50 为 101.0 nM，表明该物质与 FGL1 存在特异性结合

单字母 H2N-AAVHLRDRAL-OH

多字母 H2N-Ala-Ala-Val-His-Leu-Arg-Asp-Arg-Ala-Leu-OH

氨基酸个数 10

分子式 C48H84N18O13

平均分子量(MW) 1121.29

一种新型免疫检查点FGL1可能是肿瘤免疫治疗的潜在有效靶点。开发靶向FGL1的PET探针，有助于深入了解免疫系统状态并评估治疗效果。本研究采用ClusPro 2.0服务器分析FGL1与LAG3之间的相互作用，并通过Rosetta肽衍生物协议筛选出候选多肽。最终鉴定出三种靶向FGL1的候选多肽，分别命名为FGLP21、FGLP22和FGLP23，其模拟结合亲和力分别为-9.56、-8.55和-8.71 kcal/mol。这些多肽可高效偶联至p-NCS-苄基-NODA-GA，所得化合物成功标记了68Ga，产率约为70%，放射化学纯度超过95%。体外竞争性细胞结合实验表明，所有探针均能与FGL1结合，IC50值在100 nM至160 nM之间。在携带FGL1阳性Huh7肿瘤的小鼠模型中，PET成像结果显示，68Ga-NODA-FGLP21表现出最佳的肿瘤显像性能。在注射后60分钟时，68Ga-NODA-FGLP21的肿瘤摄取量显著高于68Ga-NODA-FGLP22和68Ga-NODA-FGLP23（分别为2.51 ± 0.11% ID/g vs 1.00 ± 0.16% ID/g 和 1.49 ± 0.05% ID/g）。同时，前者的肿瘤与肌肉摄取比也分别高于后者（19.40 ± 2.30 vs 9.65 ± 0.62 和 12.45 ± 0.72）。在未标记FGLP21存在的情况下，68Ga-NODA-FGLP21在Huh7异种移植瘤中的摄取量在注射后60分钟降至0.81 ± 0.09% ID/g，与FGL1阴性U87 MG肿瘤中的摄取水平（0.46 ± 0.03% ID/g）相近。结果与免疫组化分析及离体自显影结果一致。除肾脏外，正常器官中未见明显放射性积聚。综上所述，该临床前研究证实，示踪剂68Ga-NODA-FGLP21具有特异性检测肿瘤中FGL1表达的潜力，并能实现良好的背景对比。

参考文献：DOI: 10.1021/acs.molpharmaceut.4c01293