(D)-PPA 1 是一种抗水解 D 肽拮抗剂。(D)-PPA 1 是一种有效的 PD-1/PD-L1 抑制剂。(D)-PPA 1 与 PD-1 结合的亲和力为 0.51 μM，体内外均有效。

在相同的摩尔浓度下，化合物盐形式与游离形式有相同的生物活性，但盐形式 (D)-PPA 1 TFA 通常具有更好的水溶性和稳定性。

阻断跨膜蛋白程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）与其配体PD-L1之间的蛋白质相互作用，已成为治疗癌症的一种前景广阔的免疫疗法。

单字母 H2N-nyskptdrqyhf-OH
多字母 H2N-DAsn-DTyr-DSer-DLys-DPro-DThr-DAsp-DArg-DGln-DTyr-DHis-DPhe-OH
氨基酸个数 12
分子式 C70H98N20O21
平均分子量(MW) 1555.65
cas号：1620813-53-7

利用镜像噬菌体展示技术，研究人员开发了首批能够靶向PD-1/PD-L1通路的耐水解d肽拮抗剂。优化后的化合物 DPPA -1在体外与PD-L1的结合亲和力达0.51毫摩尔。细胞水平的阻断实验及荷瘤小鼠实验表明， DPPA -1在体内也能有效破坏PD-1/PD-L1相互作用。因此，d肽拮抗剂可能为癌症免疫治疗提供新型低分子量药物候选物。

本研究采用 DPPA -1对小鼠进行肿瘤生长及生存实验。36只Balb/c小鼠右侧胁腹皮下注射5×10⁵个CT26细胞。九天后，当肿瘤体积达到50至100 mm³时，将小鼠随机分为六组，每组六只。 DPPA -1（2 mg·kg⁻¹）通过两种方式给药：每日一次于肿瘤周围皮下注射（图3A），或连续七天每日一次腹腔注射（图3B）。分别注射生理盐水和10 mg·kg⁻¹的5-氟尿嘧啶（5-Fu）作为阴性对照与阳性对照。每日使用卡尺测量肿瘤直径，并按公式 p/6 × a × b² 计算体积。如图3所示，5-Fu注射作为阳性对照有效，但因其毒性导致小鼠体重显著下降。而在瘤周注射和腹腔注射模型中， DPPA -1均能显著抑制Balb/c小鼠体内植入CT26细胞的生长（与阴性对照相比，P值分别<0.05和<0.01），且未观察到体重下降现象。

在生存实验中，三组携带CT26肿瘤的小鼠分别每日一次腹腔注射生理盐水、 DPPA -1（剂量为2 mg·kg⁻¹）或5-Fu（剂量为10 mg·kg⁻¹），持续十二天（图3C）。从第十三天起，不再继续注射生理盐水、 DPPA -1或5-Fu，因为接受5-Fu注射的小鼠因药物毒性而病情严重恶化。每天监测各组小鼠的存活情况，直至所有小鼠死亡。结果表明， DPPA -1治疗可使携带CT26肿瘤小鼠的生存时间延长近50%：生理盐水注射组平均生存时间为27天（范围17至36天），而 DPPA -1治疗组延长至44天（范围36至52天），与5-Fu治疗组效果相当。这些结果表明 DPPA -1有望成为癌症免疫治疗的潜在候选药物。为评估 DPPA -1的肿瘤靶向性和递送效率，我们将荧光染料氰基菁5.5连接至 DPPA -1的N端。为避免肝脏和肾脏空间重叠，将CT26肿瘤细胞注射至背部；当肿瘤体积达到约200 mm³时，向携带CT26的Balb/c小鼠尾静脉注射200 mL（40 mg/只）Cy5.5- DPPA -1或Cy5.5- DPPA -1*。24小时后，采用体内近红外荧光成像技术检测Cy5.5的分布情况。实验结果显示，除肝脏、肾脏、胃和肺外， DPPA -1均在肿瘤组织部位积聚，而阴性对照组则未出现此现象（图3D），表明 DPPA -1具有靶向肿瘤组织的能力。作者还检测了 DPPA -1对CT26肿瘤细胞的细胞毒性：添加 DPPA -1后，CT26细胞仍能正常生长（图3E），这说明 DPPA -1并非直接杀伤肿瘤细胞。基于这些结果，作者认为 DPPA -1的作用机制可能源于激活抗肿瘤免疫系统，而非直接杀死CT26肿瘤细胞。

参考文献： DOI: 10.1002/anie.201506225