Dnp-PLGLWA-DArg-NH2 TFA是 MMP-1 和 MMP-9 的荧光底物。Dnp-PLGLWA-DArg-NH2TFA可用来定量MMPs的活性(Ex=280nm,Em=360nm)。
单字母 Dnp-PLGLWAr-CONH2
多字母 Dnp-Pro-Leu-Gly-Leu-Trp-Ala-DArg-CONH2
氨基酸个数 7
分子式 C45H64N14O11
平均分子量(MW) 977.08
我们报告了在人类精浆中存在两种基质金属蛋白酶(MMPs),即MMP-2和MMP-9。通过两步法实现了对这些蛋白酶的部分纯化,包括凝胶过滤柱层析和明胶亲和柱层析。层析提取物中的蛋白酶活性能够水解一种特异性的MMP荧光底物(Dnp-Pro-Leu-Gly-Leu-Trp-Ala-D-Arg-NH2)。通过明胶酶谱法检测到了这些蛋白酶,但通过酪蛋白酶谱法未检测到,并且它们还能被EDTA、EGTA和邻菲咯啉抑制。通过SDS-PAGE、明胶酶谱法和Western印迹法测定蛋白酶的分子量约为92、84、72、67、52和45千道尔顿。明胶酶谱法显示有三个主要的活性带,分别在72、67和52千道尔顿,还有三个较弱的带分别在92、84和45千道尔顿。除了两个最小的带之外,这些蛋白酶都被MMP-2或MMP-9的多克隆抗体所识别。这些结果表明,两种前体形式和活性形式的基质金属蛋白酶(MMP-2和MMP-9)及其降解产物存在于人类精浆中。
参考文献:DOI: 10.1093/molehr/8.1.32