DT-2是一种有效的、选择性的cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)抑制剂。DT-2抑制 PKG 催化的磷酸化(Ki:12.5nM)。

三字母：Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Pro-Pro-Leu-Arg-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-His-NH2

单字母：YGRKKRRQRRRPPLRKKKKKH-NH2

分子量：2800.42

分子式： C122H223N53O23

CAS 号：1220985-78-3

抑制肽DT-2（YGRKKRRQRRRPPLRKKKKKH）是目前所知对环鸟苷酸依赖性蛋白激酶（PKG）最强且最具有选择性的抑制剂。DT-2是由PKG紧密结合序列（W45，LRKKKKKH，KI=0.8微摩尔）和膜转运序列（DT-6，YGRKKRRQRRRPP，KI=1.1微摩尔）构建而成，两者结合后能强烈抑制PKG催化的磷酸化（KI=12.5纳摩尔），对PKG的选择性约为对蛋白激酶A的1000倍，而蛋白激酶A是PKG最近的同源物。然而，这种抑制作用背后的分子机制尚未完全明了。通过光亲和标记、稳定同位素标记和质谱分析的组合，我们确定了PKG特异性底物和抑制剂肽的结合位点。PKG特异性底物类似物的共价连接位于催化核心的356-372位残基上，也称为富含甘氨酸的环，这是ATP结合所必需的。由此类推，单独的抑制剂肽W45和DT-6也被发现与富含甘氨酸的环附近交联，表明它们都是底物竞争性抑制剂。发现DT-2的一种双功能光反应类似物可生成PKG二聚体。对于缺乏二聚化结构域的PKGN端缺失突变体，未观察到这种交联诱导的共价PKG二聚化。此外，利用非共价质谱法确定了抑制肽的结合化学计量比和结合顺序。二聚体PKG可结合两个W45和DT-6肽，而仅观察到一个DT-2分子与二聚体PKG结合。综合来看，这些发现表明：（i）组成DT-2的两个单独成分均针对底物结合位点；（ii）单个DT-2分子的结合可同时使两个PKG单体失活，这表明（iii）在cGMP激活的PKG中，两个亚基的催化中心可能彼此靠近。

参考文献：DOI: 10.1074/jbc.M808521200