蛋白质p16INK4a(p16)是诊断人乳头瘤病毒(HPV)相关癌症的著名生物标志物。在本研究中,文章通过噬菌体展示筛选法鉴定出了新的p16结合肽。在纯化的重组p16蛋白包被的板上筛选了随机七肽噬菌体展示文库,以仅从p16表面洗脱结合的噬菌体。通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、荧光成像技术和生物信息学计算比较了结合噬菌体的结合亲和力。通过肽阻断实验与p16单克隆抗体竞争以及荧光成像技术分别评估了最佳候选噬菌体展示p16结合肽的结合特异性和结合选择性。从噬菌体展示筛选法中分离出了五个候选噬菌体展示肽。所有候选的p16结合噬菌体在ELISA测试中均显示出比野生型噬菌体更好的结合亲和力,但只有其中三个能够区分p16过表达的癌细胞CaSki和正常子宫成纤维细胞HUF,相对荧光强度比野生型噬菌体高2.6至4.2倍。生物信息学结果表明,肽“Ser-His-Ser-Leu-Leu-Ser-Ser”与p16分子的结合得分最高,且不会干扰p16的常见蛋白质功能。肽阻断实验表明,噬菌体展示肽“Ser-His-Ser-Leu-Leu-Ser-Ser”能够使p16避免与单克隆抗体相互作用。该噬菌体克隆还能选择性地与p16阳性细胞系相互作用,因此可用于检测p16过表达细胞。
单字母 H2N-SHSLLSS-OH
多字母 H2N-Ser-His-Ser-Leu-Leu-Ser-Ser-OH
氨基酸个数 7
分子式 C30H51N9O12
平均分子量(MW) 729.78
参考文献:doi.org/10.1002/psc.2726