方法：采用12氨基酸的噬菌体展示文库，通过针对重组的人类碳酸酐酶IX胞外结构域进行淘选来实施噬菌体展示。所鉴定出的肽CaIX-P1经化学合成，并在体外对多种细胞系以及体内对皮下移植SKRC52肿瘤的Balb/cnu/nu小鼠进行了测试。在CAIX阳性的SKRC52人肾细胞癌细胞系、CAIX阴性的CaKi2人肾细胞癌细胞系、人结肠直肠癌细胞系HCT116以及人脐静脉内皮细胞（HUVEC）上进行了结合、动力学和竞争研究。在携带SKRC52肿瘤的小鼠中进行了器官分布研究。通过定量实时PCR研究了HCT116和HUVEC细胞中CAIX的RNA表达。

单字母 H2N-YNTNHVPLSPKY-OH

多字母 H2N-Tyr-Asn-Thr-Asn-His-Val-Pro-Leu-Ser-Pro-Lys-Tyr-OH

氨基酸个数 12

分子式 C66H97N17O19

平均分子量(MW) 1432.58

结果：体外结合实验中，用125I标记的CaIX-P1与阳性CAIX的肾细胞癌细胞系SKRC52进行结合，结果显示该放射性配体的摄取量增加。在结肠直肠癌细胞系HCT116中，随着细胞密度的增加，放射性配体的结合量也随之增加，并且与CAIX的mRNA表达相关。未标记的CaIX-P1肽能抑制放射性配体的摄取量高达90%，而相同浓度的阴性对照肽奥曲肽则无此抑制作用。在CAIX阴性的CaKi2和HUVEC细胞中未检测到结合。器官分布研究表明，SKRC52肿瘤中的放射性配体积累量高于心脏、脾脏、肝脏、肌肉、肠和大脑，但低于血液和肾脏。

结论：这些数据表明，CaIX-P1是开发针对人类碳酸酐酶IX的新配体的一个很有前景的候选物。

参考文献：doi.org/10.1371/journal.pone.0015962