质谱MS
我们这里所说的质谱指的是一级质谱,多肽质谱鉴定指的就是利用质谱法对多肽进行鉴定。多肽质谱鉴定主要是鉴定多肽的一级结构,通过检测多肽的氨基酸序列信息获取多肽的序列或翻译后修饰信息。多肽鉴定常用串联质谱进行。从代测样品中提取出多肽以后,先用色谱法分离,然后离子源将分离后的多肽进行离子化,之后一级质谱检测完整多肽离子的质荷比,肽库生物科技提供基于质谱的多肽鉴定服务。
高效液相色谱HPLC
高效液相色谱 ( HPLC) 的出现不仅是药物研发领域的革命, 同时也为多肽类物质的分离提供了更有利的方法。在适宜的色谱条件下应用 HPLC可以在短时间内完成对蛋白质、多肽的分离, 更重要的是 HPLC能在制备规 模上生产具有生物活性的多肽。在多肽的分离、纯化和鉴定中应用最多的是反相高效液相色谱 (RP-HPLC),约95%是C18反相硅胶HPLC。其原理是基于多肽的疏水性,在不同介质条件下,使不同的多肽得以分离,具有快速、高效和高回收的特点,在分离和制备多肽及蛋白质上有独特的优越性。
肽库生物整个工艺中会有三次HPLC确认,切割之后会进行MS和HPLC分析,制备之后会再次检测HPLC交付QC检测中心,经过再次MS确认后冻干,冻干之后,在发货之前会进行最后一次检测,并提供检测报告,如下: