DN59是一种模拟登革热病毒 2 型 E 蛋白茎区的 33 个氨基酸肽。DN59可抑制登革热病毒所有四种血清型 (IC50: 2-5 μM) 以及其他黄病毒。N59 通过直接与病毒颗粒相互作用，导致基因组 RNA 释放。DN59 具有抗病毒的活性。

登革热病毒每年感染约1亿人，但目前尚无有效的治疗方法。模拟肽DN59由对应于登革热病毒包膜(E)糖蛋白膜相互作用两亲性茎区的氨基酸残基组成。该肽对登革热病毒的所有四种血清型以及其他黄病毒均具有抑制作用。经DN59孵育的登革热病毒颗粒的冷冻电子显微镜图像重建显示，病毒颗粒基本为空心结构，同时在五重对称顶点处形成孔洞。通过RNA基因组对外源性RNase敏感性增强，以及在酒石酸盐密度梯度中基因组与E蛋白分离的现象，证实了与DN59孵育后病毒颗粒中RNA的释放。DN59与合成脂质体发生强相互作用并导致膜结构破坏，但对哺乳动物和昆虫细胞无毒性。因此，DN59通过直接与病毒颗粒相互作用，促使基因组RNA释放，从而抑制黄病毒的感染性。

一种名为DN59的33个氨基酸肽段可模拟登革热病毒2型E茎区（残基412至444）。先前研究表明，该肽段能抑制登革热2型病毒和西尼罗河病毒的感染性，但其对其他黄病毒的作用及作用机制尚不明确。图显示，在使用哺乳动物上皮细胞进行的 FFU 感染实验中，当浓度为2-5 mM时，DN59肽段可使所有四种登革热病毒血清型的感染性降低50%（半抑制浓度）。而其他黄病毒（黄热病病毒、中欧脑炎病毒和俄罗斯春夏脑炎病毒）的感染性则需更高浓度的DN59才能被抑制。

感染力的抑制作用不可逆。

将登革热病毒与10 mM DN59共同孵育（该浓度足以产生约80%的抑制效果），随后直接用于感染目标LLC-MK2细胞，或按1:10比例稀释至1 mM（该浓度仅能产生微弱甚至无抑制作用）后再用于细胞感染。经10 mM DN59处理后进一步稀释至1 mM DN59的病毒，其感染力抑制程度与未经稀释的处理病毒相同。

DN59肽与脂质膜的相互作用。

(A)DN59与脂质体囊泡具有强相互作用。图中展示了1 mM DN59与由 POPC 制备的两性离子囊泡及由 POPC 与 POPG 按9:1比例混合制备的阴离子囊泡结合时的色氨酸荧光结合曲线。各滴定步骤后335 nm处的荧光强度如图所示，实线为通过膜分配方程进行曲线拟合所得结果。

(B)DN59可破坏脂质体囊泡结构。将染料/淬灭剂对ANTS/ DPX 加入由 POPC 或 POPC / POPG（9:1）组成的0.5 mM囊泡后，孵育1小时后测量ANTS荧光强度。使用10 mM高裂解性蜂毒肽蜂毒肽（melittin）处理可实现100%的囊泡泄漏。

(C)DN59无细胞毒性。通过线粒体还原酶代谢指示剂检测法（MTT）评估DN59对 BHK -21细胞、LLC-MK2细胞和C6/36细胞的细胞毒性，结果显示即使在最高测试浓度下，DN59也未表现出显著毒性。

(D)DN59无溶血性。将DN59与绵羊红细胞共孵育后检测血红蛋白释放量，使用1%（体积比）Triton溶液处理可实现100%的溶血效果。

单字母 H2N-MAILGDTAWDFGSLGGVFTSIGKALHQVFGAIY-OH
多字母 H2N-Met-Ala-Ile-Leu-Gly-Asp-Thr-Ala-Trp-Asp-Phe-Gly-Ser-Leu-Gly-Gly-Val-Phe-Thr-Ser-Ile-Gly-Lys-Ala-Leu-His-Gln-Val-Phe-Gly-Ala-Ile-Tyr-OH
氨基酸个数 33
分子式 C161H240N38O44S1
平均分子量(MW) 3443.92
CAS号：869011-94-9

参考文献：DOI: 10.1371/journal.pone.0050995