一种阳离子肽Td3701，源自具有磷脂酰丝氨酸（PS）亲和力的第八因子，对细胞表面表达PS的细胞显示出高效的转染能力。PS会暴露在肿瘤细胞表面，因此文章将其作为肿瘤特异性基因传递的目标分子。在本文中，为了提高转染效率和针对肿瘤细胞的特异性，对Td3701的一些氨基酸残基进行了替换。所得肽Td3717显示出更高的转染效率（超过Td3701的30倍）。转染效率取决于细胞表面PS的量，表明与质粒DNA结合的Td3717能够识别细胞表面的PS。Td3717有望作为针对表达PS的肿瘤细胞的高效基因载体分子。

单字母 H2N-TRYLRLHPRSWVHQLALRLRYLRLHPRSWVHQLALRS-OH

名称：Td3717

多字母 H2N-Thr-Arg-Tyr-Leu-Arg-Leu-His-Pro-Arg-Ser-Trp-Val-His-Gln-Leu-Ala-Leu-Arg-Leu-Arg-Tyr-Leu-Arg-Leu-His-Pro-Arg-Ser-Trp-Val-His-Gln-Leu-Ala-Leu-Arg-Ser-OH

氨基酸个数 37

分子式 C215H343N73O46

平均分子量(MW) 4686.49

名称：肽 Td3701

单字母 H2N-TRYLRIHPRSWVHQIALRLRYLRIHPRSWVHQIALRS-OH

多字母 H2N-Thr-Arg-Tyr-Leu-Arg-Ile-His-Pro-Arg-Ser-Trp-Val-His-Gln-Ile-Ala-Leu-Arg-Leu-Arg-Tyr-Leu-Arg-Ile-His-Pro-Arg-Ser-Trp-Val-His-Gln-Ile-Ala-Leu-Arg-Ser-OH

氨基酸个数 37

分子式 C215H343N73O46

平均分子量(MW) 4686.49

为了提高Td3701的转染效率，将肽链中的异亮氨酸残基替换为亮氨酸残基。异亮氨酸残基由于其β-甲基的位阻作用不利于肽链形成α-螺旋结构；相反，亮氨酸残基有利于α-螺旋结构的形成。由于两亲性α-螺旋结构有利于DNA复合物的形成、内体的破坏以及整体基因转染效率，文章预期将异亮氨酸替换为亮氨酸会提高转染效率。将肽链中的所有四个异亮氨酸残基替换为亮氨酸残基，得到的肽命名为Td3717（图1）。作为对照肽，还设计并合成了Td3717-scr（TLRY-RPSH-QLRL-RAVL-HLWL-RYRP-SHQL-RLRA-VLHW-S），其序列是Td3717的打乱序列。

通过在琼脂糖凝胶上测定肽/DNA复合物的电泳迁移率，评估了Td3717与质粒DNA的结合能力。如图2所示，在正（肽）/负（DNA）电荷比为2时，Td3717抑制了质粒DNA的迁移。Td3701在电荷比为2时也表现出对DNA迁移的抑制作用，这表明异亮氨酸被亮氨酸取代并未影响该肽的DNA结合能力。

PS是主动靶向的理想靶分子，从Td3701衍生而来的肽载体Td3717显示出更高的转染效率。在试管实验中，Td3717对阴离子磷脂（即PC/PG和PC/PS）表现出亲和力。在体外转染系统中，观察到细胞表面PS的量与转染效率之间存在明显的相关性。Td3717是一种很有前景的非病毒载体，可用于靶向基因传递。

参考文献：DOI 10.1002/psc.1104